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左上圖::工作人員調試實驗室的溫度和壓力等。右上圖:將血樣放入震蕩儀加快分裂出DNA。左下圖:離心管最底端的白點就是DNA。 右下圖:檢測提取15個位點數據進行比對。
半島都市報3月12日訊(記者 韋麗麗) 12日,記者從市中心血站了解到,他們的實驗室獲得了中國合格評定國家認可委員會的認可,而其中一個實驗室就是專門做親子鑒定的。據介紹,親子鑒定的整個過程需要5到10個工作日。
“通過兩年多的努力,我們獲得了中國合格評定國家認可委員會(CNAS)的國家實驗室認可資格,取得了認可證書。”市中心血站工作人員稱,從2010年上半年,他們開始準備實驗室認可工作,以血站作為一個大的實驗室參加實驗室的認可工作,這在采供血機構是首家。據悉,市中心血站2011年6月份通過文件評審,2011年10月份通過實驗室的現場評審,近日通過中國合格評定國家認可委員會(CNAS)的國家實驗室資格認可 ,取得認可證書。
“我們實驗室包括三個。”輸血醫學研究所副主任馮智慧稱,組織配型實驗室、免疫遺傳實驗室、干細胞研究實驗室和血型參比實驗室,其中免疫遺傳實驗室就是做親子鑒定的。
“我們經常接到市民的電話咨詢是否可以進行親子鑒定。”馮智慧稱,近幾年他們每個月都能接到這種電話,前不久他還接到了一名男子的電話稱,孩子現在兩歲了,他懷疑孩子不是親生的,想鑒定一下。據介紹,在咨詢的這部分人群中除了有懷疑孩子不是親生的之外,還有打拐的以及認親的。
“其實親子鑒定這部分工作我們在2006年就開展了。”馮智慧說,不過那個時候不是針對親子鑒定來做的,而是造血干細胞移植后期檢測。患者做完干細胞移植之后,是別人的干細胞到了自己的體內,這樣后期就得看看別人的干細胞在自己體內長得如何,這個檢測流程和檢測過程中使用的試劑跟做親子鑒定是一模一樣的,后期的分析結果也都是一樣的,只不過最后出的結果不同,一個結果是生長情況,另一個結果是是否具有親子關系。
據介紹,市民做親子鑒定時,需要出示有效證件(如身份證、小孩出生醫學證明、戶口簿、結婚證或離婚證、護照、軍官證或士兵證、通行證等)。在采集血樣前需要填寫《司法鑒定程序記錄表》《司法鑒定案例基本信息登記表》有關內容。年幼或無書寫能力的當事人可直接摁右手大拇指和食指指印或右腳腳印。
20多個步驟找到生命密碼 親子鑒定究竟是如何進行的呢?12日記者走進實驗室進行了探訪,據介紹,在進行親子鑒定時先抽血,然后從血液中提取DNA ,再將DNA進行擴充 ,最后對DNA中位點數據進行比對,這樣就可以判斷是不是親生了。工作人員稱,試驗中每個環節,包括實驗時間中對時間的把握,不能有一點偏差。
采集血樣嚴防掉包
“做親子鑒定首先得進行采血。”馮智慧稱,他們實驗室可以通過血斑、口腔拭子以及ACD 抗凝血液標本進行鑒定,不過用血斑以及口腔拭子做標本不利于長期保存,所以他們做的是ACD抗凝血液標本,也就是從胳膊上采3~5毫升外周血。
“為了保證不出差錯,防止掉包,采血時至少有兩名工作人員。”馮智慧說,按照要求,標本采集接收現場必須有兩名以上工作人員,任何人不得單獨采集血當事人標本。
21個步驟析出DNA 血樣采集完后,就開始提取里邊的DNA了。當天實驗室正好有做干細胞移植進行配型的,需要從血液中提取DNA,記者便走進實驗室看看如何提取。馮智慧說,提取DNA的每一步都需要人工操作,一共有21步,需要兩三個小時的時間 ,先后需要加入五種試劑。
馮智慧稱,由于DNA是藏在白細胞的細胞核里,所以要先除去紅細胞,然后讓白細胞的細胞核裂解開,把藏在里邊的DNA釋放出來。“做這一步的時候把樣本放在震蕩儀上,震蕩儀邊晃動邊加熱,加快DNA釋放。”馮智慧稱,DNA被釋放出來之后,還要除去樣本中的蛋白,這又需要把樣本放到0℃~5℃的冰箱中冷藏。
記者在實驗室看到,樣本被冷藏 10分鐘之后,工作人員將其拿了出來,然后放在了離心機里邊。“我們要對它進行離心5分鐘,這樣蛋白紅細胞就會跟DNA 徹底分離開。”經過10分鐘的離心后,工作人員取出了樣本,記者看到離心管里的液體被分成了兩個層面,最下邊的一層看上去有些暗紅。“這個暗紅色的就是需要分離出去的部分。”工作人員解釋說。
“DNA就在這部分清澈透明的液體中,下一步就是把它提取出來。”工作人員將冷藏的乙醇倒入透明液體后,然后將管子進行顛倒晃動,不久里邊就出現了白色棉絮狀的東西。“這白色棉絮狀東西就是DNA。”工作人員稱,這還沒有結束,還需要繼續進行離心,將這些白色棉絮狀的物體析出。過了5分鐘,工作人員將其從離心機取出。這時,記者看到在離心管的最底端有一個綠豆粒大小的白點。“這個白點就是我們要的東西。”
變換溫度讓DNA繁殖 “析出來的這部分DNA太少了,如果做實驗肯定是不夠用的,所以我們還得進行擴增。”馮智慧說。
記者看到,工作人員將測量好濃度的DNA 可擴增劑加在一起,放進專用的儀器上。“這個步驟需要三個鐘頭。”工作人員稱,在這個過程中溫度是需要不斷改變的,需要好幾種溫度交換進行。據介紹,DNA是兩條鏈,擴增就得把鏈打開,然后每條鏈和所需要的材料結合。“鏈打開時需要一種溫度,結合時需要另一種溫度,所以在這個過程中溫度是需要不斷變化的。”工作人員解釋說。
讓DNA“跑位”采集數據 “DNA 擴增后,就開始進行位點比對了。”馮智慧稱,這個過程需要將DNA放入到一個完全封閉的儀器中,把它固定在一個位置,然后用電腦來操作機器。“這個過程中,DNA 會按照電腦發出的指令,從這頭跑到那頭。”工作人員稱,這樣DNA上的所有信號都會被機器收集下來。
據介紹,在一般情況下,設備會自動提取15個位點,最后再根據位點的型別套入公式進行計算,判斷是否是親子關系。
“試劑不同,位點相同的數量也不一樣,拿我們用的試劑來說,如果有三個以上位點不同,就直接排除親子關系了。”馮智慧說,如果不同的位點在三個以內,不能排除基因突變造成的不同,這種情況下還需要加做位點再次對比。據介紹,整個親子鑒定過程需要5到10個工作日。
文/記者 韋麗麗 圖/記者 王濱
(來源:半島網-半島都市報) [編輯: 宋濤]